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[建议] 志贺氏菌及其检测方法

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tjbiochip 发表于 2014-11-27 10:38:14 | 显示全部楼层 |阅读模式

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一、志贺氏菌志贺氏菌(学名:Shigella),属肠杆菌科,是一种革兰氏阴性菌。3 q7 ?) G. k+ @3 w$ o
志贺氏菌在阳光下30分钟可被杀死。但该菌耐寒,在冰块中能生存3个月,在牛奶、水果和蔬菜中可生存1~2周,被污染的衣服、用具等可带菌数月之久。   中毒食品以冷盘和凉拌菜为主。熟食品在较高温度下存放较长时间是中毒的主要原因。
4 I# J- Y- m1 F1 W- W$ M    进食污染食物后6~24小时内出现恶寒、发热、呕吐、剧烈腹痛、频繁的腹泻,水样便,混有血液和黏液;严重者出现(儿童多见)惊厥、昏迷,或手脚发冷、发绀、脉搏细而弱,血压低等表现。
, S9 J2 y" H4 ^6 V6 P    细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。志贺氏菌引起的细菌性痢疾可分为两类:
0 r+ @' \% N4 l3 Q- x3 L# }1 N4 N1.急性细菌性痢疾:分为典型菌痢、非典型菌痢和中毒性菌痢三型。中毒性菌痢多见于小儿,各型痢疾杆菌都可引起。发病急,常在腹痛、腹泻未出现,呈现严重的全身中毒症状。  s4 f" i; d+ C7 e3 M9 o, B# w. A
2.慢性细菌性痢疾:急性菌痢治疗不彻底,或机体抵抗力低、营养不良或伴有其他慢性病时,易转为慢性。病程多在二个月以上,迁延不愈或时愈时发。
% \& {' h5 }/ [0 q$ d2 x+ Q二、志贺氏菌检测方法
* p2 n0 x- q$ ?$ M* z5 s1.生化鉴定
6 r8 D7 C- A& u, |' g6 ~检查麦康凯琼脂平板,志贺氏菌的菌落为浅粉红色,半透明,将此可疑菌落接种于下列培养基中:葡萄糖肉汤,TSI琼脂斜面,赖氨酸脱羧酶肉汤,动力试验琼脂和胰胨。置35℃培养48h,但应在20h进行检查,弃去所有有动力、产H2S、产气、赖氨酸脱羧以及发酵蔗糖与乳糖的培养物。关于产生吲哚者,应弃去其44℃增菌物中的阳性培养物。至于42℃增菌培养中的所有可疑培养物皆有可能是阳性或是阴性,因此皆应予保留。/ q+ l, j0 G& r+ @  }
2.血清凝集法, N0 D7 b/ s/ f! i: }2 [0 k
志贺氏菌有 K和O抗原而无H抗原。K抗原是自患者新分离的某些菌株的菌体表面抗原,不耐热,加热100℃1小时被破坏。K抗原在血清学分型上无意义,但可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应。根据志贺氏菌抗原构造的不同,可分为四群48个血清型(包括亚型)。
8 q/ L& h: @0 {. V(1)A群:又称痢疾志贺氏菌(Sh.dysenteriae),通称志贺氏痢疾杆菌。不发酵甘露醇。有12个血清型,其中8型又分为三个亚型。
+ p* v. b3 d$ C' A- r(2)B群:又称福氏志贺氏菌(Sh.flexneri),通称福氏痢疾杆菌。发酵甘露醇。有15个血清型(含亚型及变种),抗原构造复杂,有群抗原和型抗原。根据型抗原的不同,分为6型,又根据群抗原的不同将型分为亚型;X、Y变种没有特异性抗原,仅有不同的群抗原。# a1 ?  F0 B8 }* I. w1 _
(3)C群:又称鲍氏志贺氏菌(Sh.boydii),通称鲍氏痢疾杆菌。发酵甘露醇,有18个血清型,各型间无交叉反应。- H0 k# n# s: P" u9 `, G# I
(4)D群:又称宋内氏志贺氏菌(Sh.sonnei),通称宋内氏痢疾杆菌。发酵甘露醇,并迟缓发酵乳糖,一般需要3~4天。只有一个血清型。有两个变异相,即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相为S型,Ⅱ相为R型。
8 H) o2 [& X, |- @9 Y4 n/ |; f" ~: n根据志贺氏菌的菌型分布调查,我国一些主要城市在过去二、三十年中均以福氏菌为主,其中以又2a亚型、3型多见;其次为宋内氏菌;志贺氏菌与鲍氏菌则较少见。但近年来,志贺氏菌Ⅰ型的细菌性痢疾已发展为世界性流行趋势,我国至少在10个省、区发生了不同规模流行。了解菌群分布与菌型变迁情况,对制备菌苗,预防菌痢具有重大意义。
6 h+ ^8 D8 i  v8 x# O4 }3.核酸扩增法: X( U  q; o0 f5 w9 u7 k
核酸扩增技术,即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端,然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增,使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。" _* G9 Y/ t1 z0 k8 x# m. c+ A5 B
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