脑膜炎奈瑟氏菌及其检测方法

一、        脑膜炎奈瑟氏菌

3 m/ ]3 S9 v; C' G2 E6 K       脑膜炎奈瑟氏菌（学名Neisseria meningitidis），又名脑膜炎双球菌或脑脊髓膜炎双球菌，是一种革兰氏阴性菌，主要寄居在人体鼻咽部，可通过飞沫传播。
" J0 ~8 j5 s. Z, M/ I$ X2 z3 _       人感染脑膜炎奈瑟氏菌将引起败血症或流行性脑脊髓膜炎（简称流脑）。
6 z! r9 n' L5 a0 c（1）败血症：该菌自鼻咽部侵入，进入血循环致人体发病。其释放内毒素引起皮肤瘀点、瘀斑为局部施瓦茨曼反应，激活补体，血清炎症介质明显增加，较其他革兰阴性菌强5-10倍，也较其他内毒素更易激活凝血系统，因此在休克早期便出现弥散性血管内凝血，及继发性纤溶亢进，进一步加重微循环障碍、出血和休克，最终造成多器官功能衰竭。
（2）行性脑脊髓膜炎：该细菌侵犯脑膜，进入脑脊液，释放内毒素等引起脑膜和脊髓膜化脓性炎症及颅内压升高，出现惊厥、昏迷等症状。严重脑水肿时形成脑疝，可迅速致死。
# K; x1 ~3 _# ^8 W' y% h7 o二、        脑膜炎奈瑟氏菌检测方法
1.        直接涂片检查
（1）瘀血斑：刺破瘀斑血印片，或血膜片，干燥固定后革兰染色阴性双球菌，呈肾形成对排列，可初诊。
（2）脑脊液：取脑脊液离心后沉淀物涂片，干燥固定后革兰染色，若发现中性粒细胞内或胞外革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列，结合临床可确诊。
3 n; C3 j# n5 g  f7 X; U2.        细菌培养法
1 u5 K4 }' h- ?/ d1 z将标本葡萄糖肉汤增菌培养液，直接接种于血琼脂平板、巧克力琼脂平板，置于5%-10%CO2环境中，35℃培养18-24小时后可见圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整齐、直径1-2mm的小菌落，经涂片证实为革兰阴性双球菌，并进一步根据相应的生化反应等试验予以鉴定。
/ V3 q+ C! e& X% n7 S3.        生化鉴定
, ~- w7 W. W5 \( f$ o# m6 X主要通过氧化酶、糖类发酵以及培养生长特点进行。
0 c1 _# q9 Q0 C' E1 d6 H①细菌形态呈肾形；
②氧化酶试验阳性；
③触酶试验阳性；
④分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气；
6 C' D# T! a6 E' @8 U7 q⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验。
4.        血清凝集法
根据荚膜多糖可将脑膜炎奈瑟氏菌分为A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、L、H、I、K等13个血清群，其中A、B、C群最为多见，约占90%。
关于血清凝集法用的诊断血清方面，推荐天津生物芯片公司生产的脑膜炎奈瑟氏菌全套诊断血清产品。这套产品除了包含脑膜炎奈瑟氏菌菌10个常见血清群的诊断血清。
. q: i  {/ Z9 @' k$ i+ s( L5.        核酸扩增法
     流行性脑膜炎的临床诊断通常以出现发热、呕吐、头痛等临床症状为依据。进一步的确诊则需在病人脑脊液或急性衄液中分离到脑膜炎双球菌。但分离培养方法的检出阳性率较低．并且至少需要2～3 d才能确诊感染．这对疾病的及时治疗极为不利。此外，受抗生素使用及其他非特异性因素的影响．分离培养法的灵敏度不高．极大地降低了诊断结果的可靠性。因此，寻找一种快速、灵敏并且适用于I临床诊断的检测方法已显得非常莺要。近年来，因为具有特异性好、灵敏度高、检测周期短等优点，在PCR的基础上建立的基因诊断技术已广泛应用于多种病原微生物的临床检测。四川大学华西公共卫生学院联合四川省疾病预防控制中心以PCR技术为基础，结合我国流脑的流行现状，建立了Nm ABC群的快速诊断方法。核酸扩增技术，即聚合酶链式反应（polymerase chainreaction，PCR），其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端，然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增，使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。
& V6 |- |# y( f6 G1 j; k7 R. A/ E