访霍乱口服疫苗发明人霍姆格伦：跨越时空 拯救生命

瑞典哥德堡大学微生物与免疫学系教授Jan Holmgren（扬·霍姆格伦）发明了世界上第一个霍乱口服疫苗：Dukoral。目前，Dukoral是世界卫生组织唯一获准在普通人群中应用的霍乱疫苗，在60多个国家获得应用许可，已拯救众多生命。

2 P  [3 B9 B9 [4 x  S2 L" ]鉴于Jan Holmgren在霍乱疫苗研究方面的杰出成果，1994年他获得在欧洲医学领域影响力仅次于诺贝尔奖的Louis Jeantet奖，1977年获得瑞典皇家学院医学科学奖，2007年国际粘膜免疫学会的卓越科学成就奖等。

近日，他接受《科学时报》专访，谈了成功发明这一疫苗药物的经过及后续研究中的意外惊喜，并表示希望与中国建立合作关系。
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' u0 s) A8 t. f; E8 J霍乱口服疫苗的研制关键

$ Z- u( k" y9 A, n; D瑞典并非霍乱发生严重国家，Jan Holmgren为何选择远离本国需求的科学问题开展研究？

1969年和1970年在孟加拉国，Jan Holmgren亲眼目睹了令人震撼的霍乱瘟疫。作为科学家，从全球角度做有意义的研究工作是他的责任和义务。当时，他就下定决心要研究出有效的预防应对办法。同时，瑞典希望帮助发展中国家，因此设立了援外科学基金。
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对于研究的成功，他说，这是努力工作加上好运气的结果。
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+ z5 |5 a0 b# m# u; XJan Holmgren说，成功开发出霍乱疫苗的关键，是发现了霍乱毒素B亚基的重要免疫调控功能，另外是采用口服作为给药途径。
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$ E. Z. Z, E7 y7 X1 P* v其研究表明，口服疫苗比以前常用的注射法更加有效。因为注射法不能在粘膜部位诱发有效免疫，而胃肠、呼吸道和生殖道粘膜表面的特有免疫系统需要被疫苗刺激后，才能有效激发保护性免疫。因此在各种给药途径中，口服能更好激发肠道粘膜的免疫学反应。这是让霍乱疫苗有效发挥作用的关键。
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疫苗成功经历漫长旅途

; a: J. ~) V9 Z* J1 G一名跟随Jan Holmgren工作了多年的中国学者介绍，早在1884年世界病原细菌学的奠基人和开拓者科赫（Robert Koch）就提出，霍乱的致病性很可能是由于毒素引起的，但直到上世纪70年代之前，人们还认为毒素是由一个分子构成的。Jan Holmgren的开创性工作纠正了这一看法。他在1973年首先报道，霍乱弧菌毒素由2个亚基构成——A亚基和B亚基。其毒性主要存在于A亚基，B亚基本身不具备毒性。
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自此，Jan Holmgren的团队着重研究了霍乱毒素各亚基的生物学和免疫学特性、粘膜免疫以及粘膜疫苗和给药途径。随后，他尝试了各种组合来试验霍乱疫苗的效果。他们发现，如果用灭活的霍乱全菌体加上分离出的霍乱毒素B亚基混合做成疫苗，可以经口服产生很好的粘膜免疫应答，起到预防霍乱感染的作用。因为毒素B亚基能起到很好的粘膜佐剂的作用，辅佐全菌疫苗刺激机体的免疫系统，产生有效的免疫应答。

他说，霍乱疫苗如同其他疫苗的研发一样，道路漫长而曲折。最初，他们用了5年时间弄清楚机理，首次在《自然》杂志上报道如何构建霍乱疫苗。此后又经过14年，他们克服了一个个漫漫研发路上的困难，特别是开展了慎重的安全性评估，才把一个概念发展成一个产品，使得Holmgren的全菌加毒素B亚基的配方，最终成为Dukoral，获得广泛应用。

. G, k: ]6 Y, y7 F+ v" }/ E6 v/ W药品审批本身就是一个漫长的过程，而霍乱疫苗的研发尤其长。因为人体粘膜免疫的机理并不清楚，需要将基础研究、临床免疫学研究和开发并举。人体的粘膜免疫系统建立了有效的免疫机制，但到目前为止，粘膜抵御外来病菌入侵、避免对外来抗原引起过激免疫反应的机制并不十分清楚。所以，通过粘膜疫苗来预防感染的研究仍是国际学术界的一个热点。

为了弄清其机理和效果，Jan Holmgren研制霍乱疫苗需要大规模人群试验。为此，他和哥德堡大学微生物与免疫系前主任Ann-Mari Svennerholm教授合作，指导研究团队在孟加拉国开展了为期5年、9万名志愿者参加的验证。研究过程中，在瑞典援外署的经济援助下，他们帮助孟加拉国建立了霍乱研究中心。目前，该中心成为世界卫生组织腹泻病合作研究中心。
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  Q$ z' |5 O" \5 L, m此外，他们还在莫桑比克和拉丁美洲开展了人群接种试验。
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* y6 a' S# I( n& s1 D) B# P' `! ]希望与中国建立合作关系
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Jan Holmgren说，目前，关于霍乱口服疫苗他们正在进行新一代产品的开发。在近年来和Michael Lebens博士合作开展的后续研究中，他们获得了一个意外的惊喜，因霍乱毒素B亚基与后来发现的产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）结构有相似性，服用Dukoral的接种者，也诱导出对该大肠杆菌的短期保护力，而ETEC正是导致旅行者出现腹泻的主要原因。
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他说，对中国而言，在城市里霍乱听起来似乎是个离人们比较遥远的名词，但中国人口众多，地区广泛，某些地方霍乱并未根除。同时，与中国毗邻的南亚国家霍乱流行较重，且前往的中国旅游者众多，对霍乱疫苗有一定需求。因此，他希望与中国建立合作关系。
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他说，新产品可在一年内进入临床检测。在瑞典可开展Ⅰ期临床试验，因为瑞典人喜欢旅游，招募志愿者并不困难。在第Ⅱ、Ⅲ期临床试验中，可考虑找更多国家的人测试，以便了解广谱性，包括中国人。因此，中国的任何企业若有兴趣，他都乐意开展合作，进行相关的研发活动。
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0 `0 b. A2 U. Z霍乱只是腹泻病冰山一角

Jan Holmgren说，霍乱的流行可能被低估了，霍乱只是所有腹泻病“冰山上的一角”。肠道感染引起的腹泻危及儿童和成人的健康，而仅霍乱全球每年就有300万～500万病例，每年夺去约20万人的生命。

一些霍乱流行的国家，由于缺乏有效诊断技术，不能区别霍乱与普通腹泻；有的地区即使能诊断，但因担心食品出口或旅游业受挫，不愿意向外界通报其霍乱流行情况。目前，大约一半的腹泻都由与霍乱致病机理相似的细菌引起。

5 f. {8 N) ?/ u; mJan Holmgren介绍，霍乱是所有腹泻病中最严重的。患病者在午饭时完全健康，而在午夜前一命呜呼。当霍乱弧菌侵入体内后，病人平均每小时会失去2升水。除非及时补充水分和电解质，否则都将致命。

他们的研究表明，很多别的细菌，特别是某些类别的大肠杆菌，也如同霍乱一样通过产生细菌毒素致病，因此霍乱是一个很好的研究此类细菌腹泻的模型。

Jan Holmgren和中国合作者从霍乱毒素的研究中还发现，其B亚基在某些情况下能促进粘膜免疫耐受，这对治疗自身免疫和过敏类疾病有重要启发。这是他在研究霍乱多年后的一个意外惊喜。目前，除了继续沿着霍乱疫苗研究这条路径，争取推出新一代性价比更高的产品外，他还另辟蹊径，开始了基于霍乱毒素B亚基的免疫耐受治疗研究。
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8 Y2 _# S2 W4 I" U, g% OJan Holmgren解释说，一些疾病，比如Ⅰ型糖尿病、多发性硬化、过敏等，往往是由于免疫系统对自身组织或无害异物产生了强烈的免疫反应，造成了组织伤害。通过进一步研究霍乱毒素B亚基的免疫耐受调控机理，有望开发实用的新型免疫耐受治疗药物。
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Jan Holmgren谈起这些研究进展，兴奋不已，充满期待，似乎看到了一个又一个胜利果实。

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